當前位置:Home > 醫源資料庫 > 在線期刊 > 中華醫學研究雜志 > 2005年第5卷第11期 > 三種分枝桿菌L型培養基的比較

三種分枝桿菌L型培養基的比較

來源:中華醫學研究雜志 作者:盧潤生李定越蔣紹雙鄭德福王召偉鄧大志楊筠陳秋 2006-8-19
336*280 ads

摘要: 【摘要】 目的 采用三種結核菌L型培養基對臨床標本進行檢測,并進行比較,以便為臨床應用提供參考。方法 采用相同的酸堿前處理方法,在相同的條件下,將260例痰標本和1株用INH誘導的穩定結核菌L型菌株接種在三種培養基上,觀察其生長速度、菌落大小(液體培養基除外)、污染率、陽性率及菌落形態。結果 結核菌L型在92-3TBL......


  【摘要】  目的  采用三種結核菌L型培養基對臨床標本進行檢測,并進行比較,以便為臨床應用提供參考。方法  采用相同的酸堿前處理方法,在相同的條件下,將260例痰標本和1株用INH誘導的穩定結核菌L型菌株接種在三種培養基上,觀察其生長速度、菌落大小(液體培養基除外)、污染率、陽性率及菌落形態。結果  結核菌L型在92-3TBL液體培養基內生長速度最快(10±2d),陽性檢出率以92-3TBL液體培養基和羊血培養基最高,兩者與改良TSA-L培養基比較差異有顯著性(P<0.05)。羊血培養基上的菌落大于改良TSAL培養基。污染率以液體培養基為高,但三者之間差異無顯著性。結論  三種培養基各有特點,臨床應用時,可根據情況任選一種固體培養基,可同時接種一支液體培養基。

  【關鍵詞】  分枝桿菌L型;培養基;比較
   
  Comparison for three culture media of mycobacteria L-forms

  LU Run-sheng,LI Ding-yue,JIANG Shao-shuang,et al.

  Antituberculous Institute of Sichuan CDC,Chengdu 610036,China

  【Abstract】  Objective  To evaluate the quality of 3 kinds of L-forms culture medias,then to offer reference for clinical selection.Methods  All specimens were adopted identical pre-treatment methods,and respectively,inoculated on 3 kinds of culture media under the same condition,at the same time,stable L-forms that was induced with INH was inoculated into them.Then observing their growth speed,the size of colonies(liquid medium was excepted),as well as pollution rate,positive rate,and the forms of these colonies.Results  Of all media,L-forms grew rapidly in 92-3 TBL liquid culture medium(10±2d) than other media,the highest positive rate was found in 92-3 TBL liquid culture and in sheep blood culture medium,which have a statistical significant with improved TSA-L culture medium(P<0.05).Pollution rate is remarkable in liquid culture medium,but there is no statistical significant of these 3 media.The colony size on the sheep blood culture medium were larger than improved TSAL culture medium.Conclusion  Every medium has virtues of its own.We could choose a solid culture medium in clinical application,and select one liquid culture medium at the same time.

  【Key words】  mycobacteria of L-forms;culture medium;comparison

    從分離出第一株分枝桿菌L型[1]到現在,已過去40余年。但在結核菌L型檢查方面并沒有多大的突破,從而制約了臨床檢測工作的開展。本文以臨床標本和誘導菌株為研究對象,觀察已知的三種結核菌L型培養基,在檢出率、污染率、菌落特征以及生長速度方面的情況。

  1  材料與方法

  1.1  標本來源  (1)H37RV經INH誘導傳代(主要為圓球體)菌株[1]。(2)經X線片診斷和痰涂片鏡檢為分枝桿菌陽性的患者和X線片顯示肺部有病灶,并伴有結核病的臨床癥狀,抗炎治療無效,又查不出結核桿菌的患者。

  1.2  培養基  92-3TBL培養基,由蚌埠醫學院微生物教研室提供。改良TSA-L固體培養基,參照莊氏[2]配方配制。羊血TBL固體培養基,由本室配制[3]。

  1.3  方法  (1)痰標本經酸堿中和前處理后(即1份痰標本加1mol/L NaOH 3~4份,并加入2滴酚紅作指示劑,待20~30min后用1mol/L HCl中和),每種培養基接種2支,每支0.1ml標本。(2)誘導菌株直接接種在三種TBL培養基內,每支0.1ml。(3)置37℃孵箱培養,觀察其生長速度,污染率以及菌落形態。

  2  結果

  2.1  三種結核菌L型培養基檢測260例痰標本的檢出率  共檢出77例結核菌-L型感染者,其中,L型陽性與桿菌陽性的45例;只有L型感染的為32例。92-3TBL培養基的檢出率為94%(30/32);TSA-L培養基的檢出率為84%(27/32);羊血TBL培養基的檢出率為91%(29/32)。92-3TBL培養基與羊血TBL培養基的檢出率無差異(t檢驗,P>0.05)。TSA-L培養基和羊血TBL培養基的檢出率高于TSA-L培養基(t檢驗,P<0.05)。

  2.2  將誘導菌株接種在三種結核菌L型培養基內  固體培養基表面都可見典型的L型菌落,液體培養基為L型圓球體。

  2.3  三種培養基的污染率比較  92-3TBL培養基的污染率為8.8%(23/260);TSA-L培養基的污染率為6.9%(18/260);羊血TBL培養基的污染率為6.5%(17/260)。經統計學(單因素方差分析)處理,三種結核菌-L型培養基的污染率差異無顯著性。

  2.4  生長時間的比較(天,±s)  92-3TBL培養基為(10±2)天;TSA-L培養基為(14±3)天、羊血TBL培養基為(14±3)天。

  2.5  菌落形態和菌體形態  固體培養基上的菌落為顆粒型(見圖1)和典型油煎蛋型(見圖2)。挑取菌落涂片檢查(Z-N染色),所有培養陽性的菌落都由結核菌L型圓球體組成(見圖3)。液體培養基中的細菌也均為圓球體,未見其他形態的細菌。

  2.6  培養基保存時間  92-3TBL液體培養基加入血清配好分裝后,置4℃冰箱保存3年仍然可以使用;兩種固體培養基(玻璃試管分裝)置4℃冰箱保存9個月可以使用。

  3  討論

  近年來,結核病發病率在全球呈上升趨勢,結核菌的多耐藥率也在逐年增多,這給結核病的疫情控制帶來了許多困難。結核菌L型對結核病疫情的影響以及與其它疾病的關系也受到了較多的關注。近年來的研究結果顯示,結核菌L型不僅會導致結核病復發,還會使結核菌的耐藥率上升[4]。結核菌L型感染還與肺癌[5],惡性淋巴瘤[6],慢性前列腺炎[7]等疾病密切相關。因此,建立及時、準確的結核菌L型檢測方法具有重要的臨床意義。

    結核菌L型是結核菌失去或部分失去細胞壁的變異型,抗酸染色可陽性亦可陰性,菌體形態多變,與原菌的差異較大(可表現為絲狀體、巨型體、抗酸顆粒或圓球體等),直接檢測較為困難,常需培養才能作最后確診。近年來,國內出現了多種結核菌L型培養基,如1984年莊玉輝等制備出改良TSA-L固體培養基,在國內首次誘導和培養出結核菌L型。1992年蚌埠醫學院微生物教研室制備出92-3TBL液體培養基。2004年盧潤生等制備出羊血TBL固體培養基。雖然這三種培養基,都有相關的病例檢測報告,但未見系統比較的研究文獻。

  我們用誘導菌株和臨床標本,對三種結核菌L型培養基進行了檢測比較。其結果顯示:三種培養基都可以用于結核菌L型的檢測。但結核菌L型在92-3TBL液體培養基內生長速度最快(10±2d),陽性檢出率以92-3TBL液體培養基和羊血TBL培養基最高,兩者與改良TSA-L培養基比較差異有顯著性(P<0.05)。而羊血培養基上的菌落大于改良TSAL培養基(肉眼觀察)。關于污染率,以液體培養基為高,但三種培養基之間差異無顯著性。因此,在臨床標本檢測中,建議選用一種固體培養基的同時,再加上液體培養基培養,不但可以提高檢出率,還可以增加檢測結果的準確性。

  (本文圖片略)

  【參考文獻】

  1  Mattman LH.L Variation in mycobacteria.Am Rev Respir,1960,82:202.

  2  莊玉輝,李國利,韓元華.抗酸菌L型TSAL培養基的改進.微生物學通報,1986,2(13):94.
  
  3  盧潤生,蔣紹雙,李定越,等.結核菌L型培養基的改進.四川醫學,2004,25(7):735.

  4  Golanov VS.Clinical sinificance of drug resistance of tuberculosis mycobacteria and L-forms.Tubercle,1991,12:27.

  5  汪萬英,姚敏,郭彬.結核菌L型感染與肺癌關系.中國人獸共患病雜志,1997,13(2):79.

  6  汪萬英,何杰,張世馥,等.結核菌L型與惡性淋巴瘤關系的研究.中國微生態學雜志,1995,7(3):47.

  7  王利娟,吳士彬.抗酸菌及其L型感染與慢性前列腺炎和不育的關系.中國微生態學雜志,1999,11(1):47.

  作者單位: 610036 四川成都,四川省疾病預防控制中心結核病控制所

  (編輯:秋  實)


醫學百科App—醫學基礎知識學習工具


頁:
返回頂部】【打印本文】【放入收藏夾】【收藏到新浪】【發布評論



察看關于《三種分枝桿菌L型培養基的比較》的討論


關閉

網站地圖 | RSS訂閱 | 圖文 | 版權說明 | 友情鏈接
Copyright © 2008 39kf.com All rights reserved. 醫源世界 版權所有
醫源世界所刊載之內容一般僅用于教育目的。您從醫源世界獲取的信息不得直接用于診斷、治療疾病或應對您的健康問題。如果您懷疑自己有健康問題,請直接咨詢您的保健醫生。醫源世界、作者、編輯都將不負任何責任和義務。
本站內容來源于網絡,轉載僅為傳播信息促進醫藥行業發展,如果我們的行為侵犯了您的權益,請及時與我們聯系我們將在收到通知后妥善處理該部分內容
聯系Email: