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液基超薄細胞制片在非婦科細胞檢查方面的應用研究

來源:中華醫學研究雜志 作者:鄒翠文,王山,賀青,蘇希來 2006-12-18

摘要: 液基超薄細胞制片在非婦科細胞檢查方面的應用研究(pdf) 【摘要】 目的 通過對兩種制片方法所做各種標本的分析研究,探索能夠提高細胞學檢查陽性率的方法。方法 用傳統方法和液基細胞兩種方法制片,研究兩種制片的診斷結果。結果 傳統涂片細胞學診斷結合了細胞形態、排列方式、背景等,比較容易診斷,但細胞厚薄不一,單個......


  液基超薄細胞制片在非婦科細胞檢查方面的應用研究(pdf)

    【摘要】  目的  通過對兩種制片方法所做各種標本的分析研究,探索能夠提高細胞學檢查陽性率的方法。方法  用傳統方法和液基細胞兩種方法制片,研究兩種制片的診斷結果。結果  傳統涂片細胞學診斷結合了細胞形態、排列方式、背景等,比較容易診斷,但細胞厚薄不一,單個細胞易漏診;液基制片所取標本量大,偶然性小,細胞平鋪,單個細胞容易識別,但大多數失去了細胞排列方式和背景細胞。結論  兩者配合,相互結合,同時制片,有利于提高癌細胞的檢出率。   

  【關鍵詞】  液基制片;細胞學檢查; 傳統涂片  

  The research about TCT used on  nongynecology cell examination

  ZOU Cui-wen,  WANG Shan, HE Qing, et al.

  Department of Tests Section,No 3 Hospital of Zibo City, Shandong 255029,China

  【Abstract】  Objective  To study and explore the ways of increasing the positive rate of cell examination by means of the analysis and study of the subjects which are made through two kinds of ways of making plates. Methods  To study the diagnosis results of the two ways of making plate by means of traditional way and TCT. Results  It is easy to diagnose by using the traditional way of smear cell diagnosis.Although it is easy to identify the individual cell,most of the individual cells lose the way of queuing and backgrounds due to the difference of the cells and the large amount of the subjects.Conclusion  It will be helpful to increase the examination rate of the cancer cell by means of these two ways of making plates.

  【Key words】  TCT; cytological examination;traditional making plate   

  超薄細胞檢測在婦科方面的應用是近年來應用最廣泛的一個方面,而在痰、尿、胸腹水等非婦科方面的細胞學檢查應用也開始廣泛推廣使用[1],而在這一方面的使用研究還處于探索狀態,我們對59例診斷為癌細胞的標本同時做了傳統涂片和超薄細胞制片研究分析,總結液基細胞制片是否優于傳統的制片方法,能否提高檢出率,對細胞學的診斷有無幫助,能否代替傳統的細胞涂片。

  1  材料與方法

  1.1  標本來源  痰、尿、胸腹水標本細胞學檢查時,我們同時做了液基細胞制片和傳統細胞制片,我們選取了其中59例脫落細胞、組織病理診斷為癌的病例標本,進行分析。其中選取痰33例,尿12例,胸腹水14例。33例痰標本中,鱗癌9例,腺癌17例,小細胞癌7例,尿移行細胞癌12例,胸腹水14例。

  1.2  方法

  1.2.1  痰  我們先取痰用傳統的拉片方法制成痰涂片2張,而后再取2~3ml痰加入20ml CytoLyt及1ml DDT(Dighrothreitol),振蕩器振蕩10min,使其破壞粘性,充分液化,有利于細胞分散,在保存液中利于制片,再1500r/min離心5min,棄去上清液,將沉淀物吸入20ml preservCyt保養液中混勻,用液基超薄細胞檢測系統制片。涂片均用95%的乙醇固定,HE染色鏡檢。

  1.2.2  尿  取混勻的尿5ml加入細胞離心器(cytospin)直接甩片,再取20ml尿于CytoLyt中,1500r/min 5min,棄去上清液,取沉淀加入20ml preservCyt 保養液中混勻,用液基制片機制片,如果有血尿,則在離心后的沉渣中加入10ml冰醋酸稀釋液振蕩10min,破壞紅細胞后離心5min,取沉渣加入20ml PreservCyt保養液中混勻,制片方法同痰。

  1.2.3  胸腹水  傳統制片方法:取5ml胸腹水加入細胞離心器(Cytospin)直接甩片,再取20ml混勻的胸腹水加入CytoLyt中離心5min,棄去上清液,在沉渣中加入10ml冰醋酸稀釋液振蕩10min,1500r/min離心5min,棄去上清液,取沉渣加入20ml PreservCyt保養液中,制片方法同痰。

  2  結果

  2.1  痰  標本中傳統涂片與液基制片同時陽性的標本,鱗癌6例,其中2例鱗癌液基制片陽性而傳統涂片陰性,我們對這2例提示隔日重取標本重做傳統涂片,顯示陽性;1例鱗癌液基制片陰性而傳統涂片陽性。腺癌17例,16例腺癌兩種方法制片均陽性,1例液基制片陽性,傳統涂片陰性,注意隔日重留標本檢查陽性。7例小細胞癌,5例2種方法同時陽性,2例傳統涂片陽性,液基制片陰性。

  2.2  尿  移行細胞癌中兩者同時陽性11例,1例液基細胞制片陰性而傳統方法制片陽性。

  2.3  胸腹水  14例癌細胞標本中,同時陽性的14例,均腺癌。

  2.4  兩種方法制片比較  見表1。通過對59例癌細胞標本的研究發現兩種方法制片在非婦科細胞學檢查中經卡方檢驗(P>0.05)無統計學意義。

  表1  兩種方法制片結果比較(略)

  2.5  癌細胞分型  兩種制片方法在癌細胞分型上無差異。

  3  討論

  對于痰來說:肺癌的癌細胞學陽性檢出率為60%~70%,有的報告80%以上[2]。痰查癌細胞是當前確診肺癌的主要方法之一,由于過高的陰性結果而使其受到影響[3]。所以如何提高陽性率是我們探索的一個方面。痰中的癌細胞分布不均,且常局限于某一部分,若選不中則成假陽性,特別是傳統涂片法。鱗癌細胞多單個散在分布,形態多樣,常可出現不規則,多邊形、梭形、蝌蚪形,癌細胞界限一般比較清楚,但分化差的也不清楚,核染色質呈塊狀,或粗顆粒狀,深染,有的可呈墨水滴樣,分化差的鱗癌細胞可見核仁,分化好的一般看不到,成片鱗癌細胞可帶有一定程度的鱗狀上皮的排列特點,由于腫瘤組織特別是浸潤癌和分化差的癌易發生出血壞死,所以,涂片中常常可見成片的紅細胞和壞死細胞碎片,這種背景往往提示該涂片可能為陽性,可見到成片無核的“鬼”細胞,結合鱗癌細胞形態和背景診斷鱗癌比較容易。液基制片標本由于經過化痰處理、振蕩、離心、制片機的充分混勻,而使痰中成片的細胞分散,而在片中散在的細胞多,壞死物質和炎性細胞大多被膜過濾去除,細胞總的量少、平鋪、背景清晰,細胞散在,如果標本中癌細胞數量多,也比較容易診斷,當標本中癌細胞量少,沒有成片的癌細胞和背景物,僅靠少量單個的癌細胞則很難作出診斷。傳統涂片存在的不足是取標本量少,偶然性大,但對診斷來說比較容易。液基細胞制片所取標本量大,細胞是在充分混勻的情況下吸到膜上再轉移到玻片上,細胞分散,檢出的幾率大。腺癌細胞常成團,癌細胞團大小不一,形狀不一,極性消失,失去正常的蜂窩狀結構,由于癌細胞繁殖迅速,而空間有限,所以常常相互積壓,相互適應,呈鑲嵌狀改變。可呈現桑椹樣,卵圓形,細胞界限不清楚,核膜厚,核染色質顆粒排列疏松,核仁大而明顯,成團癌細胞核常重疊,單個癌細胞往往偏位,胞漿常有分泌空泡。傳統涂片法癌細胞在片中多數是成團存在的,細胞形態相互擠壓、抱團等樣式,背景淋巴細胞多[4],結合形態特點診斷起來也比較容易。液基細胞制片的玻片中癌細胞常單個,或以3~5個小團細胞存在,很少見到大團(>20個)的腺癌細胞,因此多數是只靠細胞形態方面診斷。小細胞癌:一般認為起源于支氣管上皮的嗜銀細胞,癌細胞小,圓形、卵圓形或瓜子形,胞漿極少,細胞核約比淋巴細胞大半到一倍,有的比淋巴細胞小。單個存在時,如果經驗不足很容易誤認為淋巴細胞。核畸形明顯,染色深。癌細胞排列緊密而不重疊,成片出現時,往往呈鑲嵌樣結構,單行排列時呈束狀,常常成群出現[5]。傳統涂片由于痰被牽拉而呈帶狀細胞索,掌握這個特點診斷起來也比較容易。而液基細胞制片中由于細胞散在,則不可能見到此現象。傳統涂片中小細胞癌常常排列成脊椎樣、葡萄狀,液基細胞制片時膜的過濾作用把小的癌細胞及大部分的淋巴細胞被濾去,由于加入DDT使細胞散在更失去了大多數細胞成片分布及排列方式,僅見少量細胞脊椎樣排列。液基細胞制片優點在于所取標本量多,標本內細胞充分混勻制片,所以同一個標本在玻片上總的細胞量不會很大,但檢出癌細胞的幾率大一些,而傳統涂片在診斷上由于背景細胞沿著粘液絲的走勢,細胞的分布、細胞團的大小排列方式等特點易于診斷。從尿方面來說,移行細胞癌涂片中常見大量壞死的細胞碎片及炎癥細胞,尿不存在化痰樣處理,移行細胞癌多是單個、小團狀出現,傳統制片方法與液基制片無多大差別,液基制片優于傳統涂片的方面在于液基玻片上的紅細胞較少,避免了由于紅細胞大量的出現,干擾視野診斷。從胸腹水方面看,由于胸腹水多數是轉移癌細胞的存在[6],占98%以上,資料報道以腺癌最多占80%以上[4,7]。所以原發部位的不同胸腹水中癌細胞形態、排列方式及細胞團的大小也不盡相同。來自肺癌的腺癌細胞多以小團出現,呈腺樣、梅花樣;乳腺癌多以團出現,也有散在,細胞群呈中空圓球狀,外圍細胞密集重疊,中間細胞較疏松;卵巢癌緊密排列成團或乳頭狀,呈片狀或矛頭狀鑲嵌排列。有經驗的工作人員可以從多方面推斷癌細胞的來源,有助于指導臨床診斷。而液基制片中的癌細胞由于加入冰醋酸稀釋液振蕩、離心、混勻等多步驟對細胞的處理,使成團的癌細胞分散,失去了原來的排列方式,破壞了大的細胞團的存在,所以液基制片中對癌細胞的原發部位推斷造成一定的困難,但在癌細胞的檢出率上還是有所提高。結論:兩種方法制片,各有優缺點,傳統的方法結合了背景排列方式,易于診斷;缺點是厚薄不一,單個癌細胞容易漏診。液基制片細胞薄,背景清晰,單個細胞易于診斷,所取標本量大,克服了細胞不均,偶然性強的不足;缺點是多數失去排列方式和背景。當前基于兩方面的優劣勢,我們采取的診斷方式是:傳統涂片見到典型的癌細胞,無論液基制片是否陽性,報告查到癌細胞(鱗癌、腺癌、小細胞癌等);傳統涂片未見到典型的癌細胞,而液基制片中出現陽性,則提示重留標本,重復常規涂片,直到在傳統涂片中查到癌細胞才報告。兩者配合,相互結合,同時制片,有利于提高癌細胞的檢出率。

  【參考文獻】

  1  何淑蓉,馬正中,賀青.中華病理學雜志,2005,7(34):7.

  2  李玉松.病理技術.2000,6:966-984.

  3  施春花.痰液脫落細胞K-ras基因檢測對肺癌診斷的臨床價值.國際呼吸雜志,2006,26:2.

  4  方芳.漿膜腔積液中轉移癌原發部位的細胞學研究.中華病理雜志,2005,10(34):10.

  5  梁英銳.脫落細胞檢驗.北京:人民衛生出版社,1991,22-99.

  6  張煜和.漿膜腔積液脫落細胞端粒酶逆轉錄酶mRNA檢測及其意義.中華消化雜志,2005,2(25):2.

  7  李永,尹芙蓉.痰液脫落細胞學檢查在肺癌診斷中的價值.安徽衛生職業技術學院學報,2006,5(1):86.

  (編輯:李  木)

  作者單位: 255029 山東淄博,淄博市第三醫院 

           北京,北京醫院病理科   

 

 


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