摘要: 【摘要】 建立了高效液相色譜化/電噴霧電離-質譜定性分析射干總黃酮的方法，通過質譜識別了其中的5種化學成分。結果表明射干的總離子流色譜圖和紫外色譜圖相比具有一定的特征性，以質譜作為檢測器是一種很好的研究中藥指紋圖譜的方法。 【關鍵詞】 高效液相色譜/電噴霧電離-質譜。射干 Shegan total f......
【摘要】 建立了高效液相色譜化/電噴霧電離-質譜定性分析射干總黃酮的方法，通過質譜識別了其中的5種化學成分。結果表明射干的總離子流色譜圖和紫外色譜圖相比具有一定的特征性，以質譜作為檢測器是一種很好的研究中藥指紋圖譜的方法。
【關鍵詞】 高效液相色譜/電噴霧電離-質譜;射干
Shegan total flavonoids in the high performance liquid chromatography/electrospray ionization-mass spectrometry
YAN Qi-xin,ZHAO Jin-hua,LIN Yong-cheng,et al. School of Chemistry and Chemical Engineering of Zhongshan University,Guangzhou 510000,China
【Abstract】 The method of high performance liquid chromatography/electrospray ionization-mass spectrometry(HPLC-ESI-MS) was used for qualitative analysis of Belamcanda chinensis (L.)DC.Five component was identified by MS .The result showed that the total ion current (TIC) chromatogram of Belamcanda chinensis (L.)DC was as characteristic as UV the chromatogram.MS detector is a good alternative in the fingerprint study of traditional Chinese medicines.
【Key words】 high performance liquid chromatography/electrospray ionization-mass spectrometry(HPLC-ESI-MS); Belamcanda chinensis (L.)DC
射干為鳶尾科(Iridaceae)射干屬植物射干Belamcanda chinensis (L.)DC.的干燥根莖。為常用正品中藥，射干載于2000年版《中國藥典》，是具有國家標準的中藥材。主產于河南、湖北、浙江、安徽、江蘇等省。射干味苦、寒，入肝、肺經，降火、解毒、散血、消腫，用于熱毒痰火郁結，咽喉腫痛，咳嗽氣喘、肝炎、乳腺炎等，為治療喉痹咽痛之要藥。主治咽喉疾患之方劑，大多以射干為君藥組方，療效較好。其主要成分為異黃酮類[1，2]，對其含量測定有見報道[3]，但采用高效液相色譜-電噴霧離子化-質譜分析方法的研究尚未見報道，為此，我們對其進行深入研究，為射干的質量控制提供了依據。
1 實驗部分
1.1 試劑和樣品 乙腈為色譜純，水為純凈水;其他試劑均為分析純。射干總黃酮提取物自制(按大孔樹脂方法制備)。對照品射干苷(tectorigenin)自提(HPLC檢測純度99%)。
1.2 儀器和條件
1.2.1 液相色譜部分 Agilent 1100型高效液相色譜儀，包括低壓四元梯度泵、二極管陣列檢測器、自動進樣器、在線脫氣機。色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C8, 4.6mm×250mm。檢測波長266nm,溫度40℃。流動相為水/乙腈梯度洗脫,洗脫程序條件為，0min:A：B為85：15;40min:A：B為50：50(其中:A為含0.2%磷酸水，B為乙腈)。
1.2.2 質譜部分 儀器:ICQ advantage 型質譜儀(美國Finnigan 公司)，Thermo Fingan surveryer (包括MS pump、Auto sampler-poA Detector)。ESI源:源電壓：4.5kV;正離子檢測;鞘氣(N2);流速:70;輔助氣(N2),流速:20;碰撞氣體為氦氣;毛細管溫度280℃;毛細管電壓43V;采用掃描方式，掃描范圍m/z=200～1000。
1.3 樣品處理 取樣品適量，80℃減壓干燥(4～6h)至恒重，精密稱定25mg,轉移至50ml容量瓶中，加70%乙醇40ml，常溫下超聲30min,取出冷卻到室溫，加70%乙醇至刻度，搖勻、過濾，取續濾液2～10ml容量瓶中,70%乙醇定容至刻度，搖勻。即可測定。
2 結果和討論
2.1 色譜圖 通過對樣品進行DAD190-400nm紫外掃描和質譜儀全掃描,得到紫外色譜圖和總離子流圖譜，見圖1。圖1 中間體的紫外色譜圖(A)和總離子流色譜圖(B)UV chromatography (A)and TLC chromatogram (B)of the extract of Shegan
2.2 質譜解析 見圖2～6。在RT為12.34時，為射干苷(tectoridin)，其分子量為C22H22O11(462),UV為266，333，ESI-MS中：m/z463為[M+H]+，301[M+H]+-glu(162), 286[M+H]+-glu(162)-CH3,270[M+H]+-glu(162)-CH3O。在RT為13.82時，為野鳶尾苷(iridin)，其分子量為C24H26O13(522),UV為266，333，ESI中：m/z523為[M+H]+，361[M+H]+-glu(162)，331[M-glu(162)-CH3O,301[M-glu(162)-2CH3O, 226[M+H]+glu(162)-145(4CH3O,2OH,O)。在RT為22.33時，為鳶尾苷元(tectorigenin)，其分子量為C16H12O6(300),UV為266，333，ESI中：m/z301為[M+H]+。在RT為24.13時，為野鳶尾黃素(irigenin)，其分子量為C18H16O8(360),UV為267，322，ESI中：m/z361為[M+H]+，361[M+H]+-CH3(15)，343[M+H]+-H2O。圖2 在RT為12.34峰的質譜圖 圖3 在RT為13.82峰的質譜圖圖4 在RT為22.33峰的質譜圖圖5 在RT為24.13峰的質譜圖圖6 在RT為31.39峰的質譜圖在RT為31.39時，為次野鳶尾黃素(irisflorentin)，其分子量為C20H18O8(386),UV為265，322，ESI中：m/z387為[M+H]+，357[M+H]+-CH3O(15)，301.8 。
3 結論
射干總黃酮主要為射干苷(tectoridin)、鳶尾苷元(tectorigenin)、野鳶尾苷(iridin)、野鳶尾黃素(irigenin)和次野鳶尾黃素(irisflorentin);射干的總離子流色譜圖和紫外色譜圖相比具有一定的特征性，以質譜作為檢測器是一種很好的研究中藥指紋圖譜的方法。
【參考文獻】
1 Qin Minjian(秦民堅),Ji Wenliang(吉文亮),Wang zhengtao (王崢濤). Chinensis Traditional and Herbal Drugs(中草藥)，2004,35(5):487-490.
2 Qin Minjian(秦民堅),Ji Wenliang(吉文亮),Wang zhengtao (王崢濤).Journal of China pharmaceutical university(中國藥科大學學報),2001,32(3):197-199.
3 Huang Dein(黃得林),Gao Zhongyi(高仲義).West China Journal of Pharmaceutical Sciences.(華西藥學)1997,12(2):115-116.
