主題:顯色

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顯色培養基在檢測食品中沙門菌的應用研究

【摘要】  目的 考核顯色培養基對沙門菌的檢測效果,以新型快速檢測方法。 方法 按國標(GB4789.4-2003)程序比較幾種培養基檢測食品中沙門菌的效果。 結果 以CHROMagar沙門菌顯色培養基、HKM沙門菌顯色培養基與傳統平板DHL對測試菌株和實際樣品檢測可以達到相近的檢測限和靈敏度。HKM沙門菌顯色培養基對某些沙門菌的檢出靈敏度比CHROMagar沙門菌顯色培養基更高。 結論 用顯色培養基檢測沙門菌是一種新快速途徑,可大大提高檢測效率。

【關鍵詞】  顯色培養基;沙門氏菌;快速檢測

Application of chromogenicmedia in detection of Salmonellae in food.

  ZHU Hai-ming, LAO Wei-dong, LU Mian-fei, et al.

  (Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou 510300, Guangdong, P. R. China)

  Abstract:Objective  To observe the results of chromogenicmedium in detection of Salmonellae for setting up a new rapid detection method.  Methods  The method was developed according to GB4789.4-2003.  Results  The sensitivity and detection limit of chromogenic media CHROMagarSalmonellae and HKMSalmonellae was the same as compared ti that of traditional media DHL, While the specificity of HKMSalmonellae was superior to that of CHROMagarSalmonellae.  Conclusion  Chromogenicmedia is a new for rapid detection of Salmonellae as it can greatly increase the detection rate.

  Key words:Chromogenicmedia;Salmonellae;Rapid detection

  沙門氏菌是腸桿菌科中一重要致病菌屬,也是引起細菌性食物中毒的主要病原菌之一[1]。隨著食品生產和國際貿易的迅速發展,沙門菌檢測作為食品安全與質量檢測的重要指標,目前國內采用的國標法(GB4789.4-2003)只適用于沙門菌的選擇性分離培養,不能特異性檢出沙門菌。用顯色培養基檢測細菌是一種新的快速方法,通過在培養基中加入細菌特異性酶的顯色底物,直接觀察菌落顏色就可對菌種作出鑒定[2]。本文通過對培養基的靈敏度、特異性以及實際樣品檢測,比較了 CHROMagar沙門菌顯色培養基簡稱(CHROMagar)、HK沙門菌顯色培養基(簡稱HK)與傳統平板DHL的檢測效果。

  1  材料與方法

  1.1  標準菌株來源  大腸桿菌ATCC25922、費氏檸檬酸桿菌ATCC8090、鼠傷寒沙門菌CMCC(B)50115、金黃色葡萄球菌ATCC6538、腸炎沙門菌CMCC(B)50335、湯卜遜沙門菌CMCC(B)50023、傷寒沙門菌CMCC(B)50071、奇異變形桿菌CMCC(B)49005、嗜水氣單胞菌GIM1.172、銅綠假單胞菌ATCC9027,均由廣東省微生物研究所提供。

  1.2  培養基及試劑  CHROMagar沙門菌顯色培養基由法國科瑪嘉公司提供;  HK沙門菌顯色培養基基礎和選擇性添加劑由廣東環凱微生物科技有限公司提供;DHL干粉培養基由北京陸橋技術有限責任公司提供;GNI+試劑條由法國梅里埃公司提供。

  1.3  主要儀器  法國生物梅里埃公司 Biomerieux全自動微生物鑒定系統(VITEK32)。

  1.4  樣品  從廣東省污染物監測網檢測結果中挑取微生物污染嚴重的樣品,其中熟食20份,蔬菜、牛奶各10份。

  1.5  方法

  1.5.1  培養基制備  CHROMagar沙門菌顯色培養基、HKM沙門菌顯色培養基、DHL干粉培養基均按說明書制備。

  1.5.2  顯色培養基特異性和靈敏度檢驗  將大腸桿菌、費氏檸檬酸桿菌、鼠傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌、腸炎沙門菌、湯卜遜沙門菌、傷寒沙門菌、奇異變形桿菌、嗜水氣單胞菌、銅綠假單胞菌沙門菌參考菌株畫線接種在營養瓊脂培養基上37℃培養24h后,挑取單菌落加到10ml 0.85%生理鹽水中配成原液(n×108cfu/ml),然后進行10倍梯度稀釋,取10-5、10-6、10-7菌液各100μl,分別涂布CHROMagar培養基、HK培養基平板,37℃培養24h,觀察菌落特征、量取菌落直徑和計算沙門菌平板的菌落數。

  1.5.3  實際樣品檢測  從超市和菜市場購買實際樣品共40份,按國標GB4789.4-2003稱取、稀釋樣品,各取100μl樣品稀釋液涂布于CHROMagar平板、HK平板、DHL平板,經37℃×24h培養后觀察沙門菌的檢出情況。

  1.6  分離鑒定  將疑似菌落分離純化,用法國梅里埃公司GNI+試劑條進行生化鑒定。

  2  結果

  2.1  顯色培養基的特異性  CHROMagar培養基、HK培養基均有較好的顯色效果。CHROMagar培養基上的沙門菌菌落為紫色,HK培養基上沙門菌菌落呈現品紅色(見表1);金黃色葡萄球菌在兩種培養基上均不生長;嗜水氣單胞菌和銅綠假單胞菌在HK培養基上不生長,在CHROMagar培養基上生長且顏色與沙門菌相似(分別為紫色和淺紫紅色);變形桿菌在CHROMagar培養基上不生長而在HKM培養基上的菌落為白色,可與沙門菌相區分;費氏檸檬酸桿菌和大腸桿菌在兩種培養基上均為藍綠色。

  表1  不同沙門菌種的菌株在顯色培養基上的生長情況(略)

  2.2  顯色培養基的靈敏度  由表1可見,涂布相同濃度和劑量的4種沙門菌在兩種顯色培養基平板上,37℃培養24h后,菌落總數和菌落直徑結果均有差異。腸炎沙門菌在HK平板上的菌落數比在CHROMagar平板上約多5倍,湯卜遜沙門菌和傷寒沙門菌的結果較相近。傷寒沙門菌在CHROMagar培養基上菌落直徑(1.97mm)遠大于HK培養基(0.95mm),其他3種沙門菌在HK培養基上的菌落大于CHROMagar培養基上的。
  
  2.3  實際樣品檢測  40份實際樣品檢測出的陽性菌株經VITEK32的GNI+鑒定,結果詳見表2。

  表2  三種培養基檢測40份樣品中沙門菌結果比較(略)

  3  討論

  沙門菌廣泛存在于自然界中, 主要是通過食品(特別是動物性食品) 傳播、感染人體。國標法是目前國內絕大多數檢測機構都在使用的方法,由于其檢測周期長、程序復雜、所需試劑繁多等缺點,已遠遠不能滿足現代檢測要求。顯色培養基法的原理是使用適當的熒光或顯色底物,在細菌特異性酶作用下,產生熒光或顯示一定顏色,用紫外燈觀察細菌產生的熒光或直接觀察菌落顏色,減少對菌株進行純培養和生化鑒定步驟,可以把檢測、計數和鑒定一次完成[3],縮短檢測周期。HKM和CHROMagar培養基上的沙門菌呈現品紅或紫色的菌落與各自特異的酶底物和顯色劑有關。兩種培養基均能抑制金黃色葡萄球菌的生長,大腸桿菌、費氏檸檬酸桿菌、奇異變形桿菌等雜菌或被抑制或菌落顏色與沙門菌有明顯差別。在CHROMagar培養基上,嗜水氣單胞菌和銅綠假單胞菌與沙門菌菌落顏色無法區別,而HK顯色培養基對這兩種菌有良好的抑制作用。從4種沙門菌的涂布培養結果可見,傷寒沙門菌在CHROMagar培養基上的菌落較大,而HK培養基對某些沙門菌檢測的靈敏度比CHROMagar培養基多數倍,菌落直徑也明顯較大。在實際樣品檢測中,3種培養基對牛奶、生雞肉中沙門菌的檢出率相同,而對熟食樣品檢出率差異較大,原因可能是熟食在生產加工的過程中添加的有機和無機成分種類多且復雜,影響了酶與底物的反應,同時熟食較牛奶和生雞肉雜菌污染量大,使檢測結果出現一定比例假陽性或假陰性,從而干擾目標菌的檢測,降低顯色培養基的敏感性和特異性。綜上所述,顯色培養基在微生物檢測中的應用,可大大提高測效率,滿足應急需要。

【參考文獻】
  [1] 余氵賀.醫學微生物學 [M].北京:人民衛生出版社,1983,303~305.

  [2] 吳清平,周艷紅,蔡芷荷. 衛生微生物特異性顯色培養基的研究與應用[J].中國衛生檢驗雜志,2005,15 (1) :124~126.

  [3] 盧勉飛,吳清平,劉云林,等. 特異性酶反應在食源性致病菌檢測中的應用[J].中國衛生檢驗雜志, 2005,15 (3):354~356.


作者單位:廣東省科技計劃項目:2005B60302011 廣東省疾病預防控制中心,廣東 廣州 510300; 廣東環凱微生物科技有限公司, 廣東 廣州 510070.

日期:2010年1月13日 - 來自[2007年第7卷第9期]欄目

ELISA中非特異性顯色原因分析

【摘要】:影響ELISA中非特異性顯色的原因很多,如試劑盒特異性、檢驗標本中含酶標記物的干擾物,操作過程中的問題。本文就這一原因作一簡要分析,以便可以通過以上措施把非特異顯色降至最低限度,從而提高檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實驗結果。

  【關鍵詞】     ELISA     非特異性     顯色
  酶聯免疫吸附試驗(ELISA)自1971年自問世以來,以其敏感性高,特異性強,操作簡便、安全,而廣泛應用于臨床診斷,開創了免疫學診斷的新紀元。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、生產及使用中常常會碰到非特異性問題,本文就在實驗過程中產生的一些原因及如何采取一些措施,消除非特異性顯色作一分析。

  1、試劑盒特異性因素
  1、1
  固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板最為常見[1]。它具有良好的吸附性能,孔底透明度高,空白值低,各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各產品的質量差異很大。因此,在選擇試劑盒同時要對其使用的微孔板型號進行認證,評估。

  1、2包被物的純度。在酶聯免疫測定尤其是間接ELISA中,試劑的特異性取決于使用抗原的純度。目前由于技術條件的限制,包被用抗原或抗體的純度不可能達到100%,所以有些非特異性顯色不可避免,只能盡可能提高純度,提高特異性。目前使用的包被抗原一般為合成多肽抗原。

  1、3包被抗體的效價。具有高親和力和高特異性的包被抗體,是決定試劑特異性的重要方面。
  1、4 封閉。是ELISA中重要的一步,目的是封閉固相載體表面尚未被所占據的空隙[2],減少后續步驟中非特異性蛋白的干擾。
  2、檢驗標本中含有酶標記物的干擾物
  2、1內源性干擾物:類風濕因子(RF)、黃疸等,類風濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的自身抗體,多數為IgM類,能充當抗原成分與固相及酶標抗體反應,從而呈現非特異性顯色。

  黃疸血標本中常含有內源性過氧化物酶,如用辣根過氧化物酶為標記物,就有可能產生非特異性顯色。
  2、2
  外源性干擾物,常常因樣品采集、貯存、處理不當造成如樣品溶血,被細菌污染,標本凝集不全等。溶血標本,紅細胞溶解破裂,釋放出血紅素形成,而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP(辣根過氧化酶)[2],有國內報道酶免HBsAg試劑檢測溶血標本時可造成假陽性[3]。如在冰箱中保存過久,其中的IgG可發生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深[2]。因此,血標本在采集處理時應小心,在冰箱中保存不易過久。

  標本凝集不全時,血清中會殘留部分纖維蛋白原,也易造成假陽性。
  3、操作過程中的問題造成假陽性
  3、1加樣
  對于間接ELISA標本一般都要進行稀釋,如果加樣不準就會造成誤差,尤其當稀釋倍數大時,很小的絕對誤差,會導致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標本呈陽性(或陰性)。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統處理標本,可較好地避免以上誤差。

  3、2洗滌
  在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復結果的關健一步,應引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作,得出不正確的結果常與不正確的洗滌有關,ELISA就是靠洗滌來達到分離游離和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。

  3、3 溫育
  每種試劑都有其最佳反應模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應時間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,反應板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發,板上應加蓋。

  3、4酶標儀判讀
  作為記錄測定結果的儀器,酶標儀的性能穩定與否,決定結果的可靠度。首先酶標儀應定期進行保養,對濾光片要定期校正;其次酶標儀波長設置要正確,最好使用雙波長,一個檢測波長,一個參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標儀讀數時最好先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標儀性能有所不同,使用中應詳細閱讀說明書

  綜上所述,由于酶聯免疫吸附技術目前在技術上缺乏標準化,盡管目前國際上以及我國有了部分標準血清或參比血清(血清盤)。但由于受方法學及技術條件的限制,在酶聯吸附測定中有時不可避免的會出現一定的非特異性,但我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至最低限底,從而提高檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實驗結果。


  參考文獻
  [1] 王培華,主編.輸血技術學[M].第1版.北京:人民衛生出版社,1998.84.
  [2] 鄭懷充,韓松,主編.臨床檢驗.ELISA指南[M].北京:北京醫科大學、北京協和醫科大學聯合出版社,1994.40.
  [3] 劉振玉,張淑琴,馬宏偉,等.溶血對抗—HIV、HBsAg等測定結果的影響[J].中國輸血雜志,1999,12(1):32.

日期:2009年2月17日 - 來自[檢驗醫學]欄目

薄層色譜技術

包括制板、點樣、展開、顯色、檢測等。

(一)   制板

方法:涂布法、傾注法、浸潤法、噴涂法。

這里介紹傾注法:

1、清板:載板是表面平滑的玻璃板,矩形,規格根據需要定,常見有:5×15;5×20;8×20;10×20;20×20等。同玻璃儀器洗滌方法洗凈、晾干或烘干、用乙醇擦凈。

2、調漿:稱一定量吸附劑于研缽中(0、3mm薄層100平方厘米需硅膠G1克三氧化二鋁1、2克),加2倍量水(先加部分,迅速研磨,再倒入全部水),研磨至漿液剛粘稠時進行涂布。

注意:掌握加水量;研磨動作適中,防止產生氣泡;掌握漿液的涂布“火候”。

3、涂布:將漿液沿玻棒倒于板的一端,并將這端提起,用玻棒帶動吸附劑涂遍整板迅速震拍使厚薄均勻,平放、晾干(10-15分鐘)。

    這一步是關鍵,要求涂布好的薄層,厚薄均勻、表面平滑、沒有氣泡波紋、牢固不易脫落。

4、活化:風干后的薄層板直接放于烘箱中烘干或放在干燥鋁架上烘干。烘干溫度與時間視需要定,一般硅膠板在105℃下烘1小時,三氧化二鋁板在200-220℃下烘4小時。活化后的薄層板儲存在干燥器內一周后應另行活化。

(二)   點樣

    這是關鍵的操作,只有原點足夠小,形狀規則,才有可能得到較高的分離度和靈敏度。

要求:點樣精確、迅速(不超過10分鐘);斑點集中(溶劑擴散直徑不超過3mm);各點大小一致,在同一起始線上。

工具:微量注射器或定體積毛細管。

操作:刀片刮去薄層板邊緣的吸附劑;作出起始線和溶劑前沿記號(起始線距底端2-3厘米,前沿視展距而定);用注射器點樣,點與點間距1、0-1、5厘米,點與邊緣距離0、5厘米。

注意:板不得點破;點樣體積少于2微升;點樣量幾至幾十微克;邊點邊用洗耳球吹風以去溶劑;點樣時間長時要在干燥盒內點樣。

(三)   展開

方法:上行法、下行法、園形離心法、園形向心法、程序多級展開法等,最多的是上行法。

裝置:展開 (立式、臥式)(內襯濾紙,以使溶劑揮發)。

方法:

1、內加適量展開劑,加蓋密閉10分鐘,使內溶劑蒸汽飽和。

2、將薄層板點有樣品液的一端浸入展開劑中(5-7mm)。蓋好蓋子(注意展開劑不得浸沒樣點、浸沒部分要與起始線平齊)。

3、展開到達溶劑前沿時取出薄層板揮干溶劑。

注意:展開劑用過1-2次后要更換,因底劑與洗脫劑的比例已改變;展開過程中槽內要保證溶劑蒸氣飽和,以防邊緣效應。

(四)   顯色

1、顯色劑顯色法:噴霧顯色,借助噴霧器噴細霧至板面濕潤。

2、紫外線照射法:如AFTB1在WL365nm觀察;有機氯在254nm下顯色。

3、對本身是有色的斑點則不需顯色。

(五)   定性定量

1、定性:斑點顯色后量出高度,求得Rf值,通過查閱文獻鑒別各種物質。

但Rf可受到外界因素的影響而使不易重現,這些外界因素有:

    吸附劑的種類及粗細度、粘合劑的性質及含量、薄層厚度、展開系統組成、展開槽內蒸汽的飽和程度、展距、薄層板活性及點樣量大小等。

    所以通常的定性方法是將樣液和標液點到同薄層上作對照。為了增加鑒定可靠性,可進行確證或更換展開系統。

2、定量:

    傳統的方法是目視半定量法,此法簡便易行,無需貴重儀器,易于推廣。

(1)最低檢出量法,用不同濃度的標準溶液點板、展開、顯觀察、反復核定在該實驗條件下標準物質的最低檢出量是多少。

    最低檢出量(ug)=最低檢出量時的體積(ul)*標準溶液濃度(ug/ul)

    將不同量的樣液與最低檢出量時的標液點板,薄層色譜分離,經顯色后觀察。如果各標準點相同位置上樣液的斑點大小、顏色深淺相同,就可以認為滴加的樣液中含有最低檢出量待測物;如果比最低檢出量點顏色深,則需稀釋,直到相同。

(2)目視直接比較法:在同一薄層板上點不同體積的樣液和各種濃度的標液,展開、顯色后,用肉眼觀察比較與標準的面積大小和顏色深淺,臺兩者近似,即可以認為此樣品液體積中含待測物量與標準點中所含物質的量相同。

    近十年,原位直接定量有了新的發展,薄層掃描儀和棒狀薄層色譜氫焰掃描儀的出現,使極微量的物質(PPb-PPm級)在分離后可直接在薄層上得到精確的定量,從而使該法從過去的半定量成為現代化全新定量。

日期:2008年5月23日 - 來自[色譜入門]欄目

各種顯色劑及其配制方法

碘:
不飽和或者芳香族化合物
配制方法
在100ml廣口瓶中,放入一張濾紙,少許碘粒。
或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅膠
紫外燈
含共厄基團的化合物,芳香化合物
硫酸鈰:
生物堿
配制方法
10%硫酸鈰(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化鐵
苯酚類化合物
配制方法
1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羥基黃酮)
廣譜, 有熒光活性
配制方法
0.1% 桑色素+甲醇
茚三酮
氨基酸
配制方法
1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
醛和酮
配制方法
12g二硝基苯肼+ 60mL 濃硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇
香草醛(香蘭素)
廣譜
配制方法
15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 濃硫酸
高錳酸鉀
含還原性基團化合物,比如羥基,氨基,醛
配制方法
1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3個月
溴甲酚綠
羧酸,pKa<=5.0
配制方法
在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚綠,緩慢滴加0.1M的NaOH水溶液,剛好出現藍色即至。
鉬酸鈰
廣譜
配制方法
235 mL 水 + 12 g 鉬酸氨 + 0.5 g 鉬酸鈰氨 + 15 mL 濃硫酸
茴香醛(對甲氧基苯甲醛)1
廣譜
配制方法
135 乙醇 + 5 mL 濃硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛,劇烈攪拌,使混合均勻.
茴香醛(對甲氧基苯甲醛)2
萜烯,桉樹腦(cineoles), withanolides, 出油柑堿(acronycine)
配制方法
茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)
磷鉬酸(PMA)
廣譜
配制方法
10 g of 磷鉬酸+100 mL 乙醇
日期:2008年2月3日 - 來自[常用試劑]欄目

TLC顯色試劑及配方大全

顯色劑可以分成兩大類:一類是檢查一般有機化合物的通用顯色劑;另一類是根據化合物分類或特殊官能團設計的專屬性顯色劑。顯色劑種類繁多,本章只能列舉一些常用的顯色劑。
l.通用顯色劑
①硫酸常用的有四種溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液與0.5-1.5mol/L硫酸銨溶液,噴后110oC烤15min,不同有機化合物顯不同顏色。
②0.5%碘的氯仿溶液 對很多化合物顯黃棕色。
③中性0.05%高錳酸鉀溶液 易還原性化合物在淡紅背景上顯黃色。
④堿性高錳酸鉀試劑 還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色。
溶液I:1%高錳酸鉀溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸鈉溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合應用。
⑤酸性高錳酸鉀試劑 噴1.6%高錳酸鉀濃硫酸溶液(溶解時注意防止爆炸),噴后薄層于180oC加熱15~20min。
⑥酸性重鉻酸鉀試劑 噴5%重鉻酸鉀濃硫酸溶液,必要時150oC烤薄層。
⑦5%磷鉬酸乙醇溶液 噴后120oC烘烤,還原性化合物顯藍色,再用氨氣薰,則背景變為無色。
⑧鐵氰化鉀-三氯化鐵試劑 還原性物質顯藍色,再噴2mol/L鹽酸溶液,則藍色加深。
溶液I:1%鐵氰化鉀溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化鐵溶液;臨用前將溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.專屬性顯色劑
由于化合物種類繁多,因此專屬性顯色劑也是很多的,現將在各類化合物中最常用的顯色劑列舉如下:
(1)烴類
①硝酸銀/過氧化氫
檢出物:鹵代烴類。
溶液:硝酸銀O.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀釋至200ml,再加30%過氧化氫1滴。
方法:噴后置未過濾的紫外光下照射;
結果:斑點呈暗黑色。
②熒光素/溴
檢出物:不飽和烴。
溶液:I.熒光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先噴(I),然后置含溴蒸氣容器內,熒光素轉變為四溴熒光素(曙紅),熒光消失,不飽和烴斑點由于溴的加成,阻止生成曙紅而保留熒光,多數不飽和烴在粉紅色背景上呈黃色。
③四氯鄰苯二甲酸酐
檢出物:芳香烴。
溶液:2%四氯鄰苯二甲酸酐的丙酮與氯代苯(10:1)的溶液。
方法:噴后置紫外光下觀察。
④甲醛/硫酸
檢出物:多環芳烴。
溶液:37%甲醛溶液O.2ml溶于濃硫酸l0ml。
(2)醇類
①3,5一二硝基苯酰氯
檢出物:醇類。
溶液:I.2%本品甲苯溶液;Ⅱ.0.5%氫氧化鈉溶液;Ⅲ.O.002%羅丹明溶液。
方法:先噴(I),在空氣中干燥過夜,用蒸氣薰2min,將紙或薄層通過試液(Ⅱ)30s,噴水洗,趁濕通過(Ⅲ)15s,空氣干燥,紫外燈下觀察。
②硝酸鈰銨
檢出物:醇類。
溶液:I.1%硝酸鈰銨的0.2mol/L硝酸溶液;Ⅱ.N,N-二甲基-對苯二胺鹽酸鹽1.5g溶于甲醇、水與乙酸(128m1+25m1+1.5m1)混合液中,用前將(I)與(Ⅱ)等量混合。噴板后于105oC加熱5min。
③香草醛/硫酸
檢出物:高級醇、酚、甾類及精油。
溶液:香草醛1g溶于硫酸lOOml。
方法:噴后于120oC加熱至呈色最深。
④二苯基苦基偕肼 ’
檢出物:醇類、萜烯、羰基、酯與醚類。
溶液:本品15mg溶于氯仿25ml中。
方法:噴后于110oC加熱5~lOmin。
結果:紫色背景呈黃色斑點。
(3)醛酮類
①品紅/亞硫酸
檢出物:醛基化合物。
溶液:I.0.01%品紅溶液,通入二氧化硫直至無色;Ⅱ.0.05mol/L氯化汞溶液;
Ⅲ.O.05mol/L硫酸溶液。
方法:將I、Ⅱ、Ⅲ以1:1:10混合,用水稀釋至l00ml。
②鄰聯茴香胺
檢出物:醛類、酮類。
溶液:本品乙酸飽和溶液。
③2,4-二硝基苯肼
檢出物:醛基、酮基及酮糖。
溶液:I.0.4%本品的2mol/L鹽酸溶液; Ⅱ.本品O.1g溶于乙醇l00ml中,加濃鹽酸lml。
方法:噴溶液I或Ⅱ后,立即噴鐵氰化鉀的2mol/L鹽酸溶液。
結果:飽和酮立即呈藍色;飽和醛反應慢,呈橄欖綠色;不飽和羰基化合物不顯色。
④繞丹寧
檢出物:類胡蘿卜素醛類。
溶液:I.1%~5%繞丹寧乙醇溶液;Ⅱ.25%氫氧化銨或27%氫氧化鈉溶液。
方法:先噴溶液I,再噴溶液Ⅱ,干燥。
(4)有機酸類
①溴甲酚綠
檢出物:有機酸類。
溶液:溴甲酚綠0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml。
方法:浸板。
結果:藍色背景產生黃色斑點。
②高錳酸鉀/硫酸
檢出物:脂肪酸衍生物。
溶液:見通用顯色劑酸性高錳酸鉀。
③過氧化氫
檢出物:芳香酸。
溶液:0.3%過氧化氫溶液。
方法:噴后置紫外光(365nm)下觀察。
結果:呈強藍色熒光。
④2,6-二氯苯酚-靛酚鈉
檢出物:有機酸與酮酸。
溶液:0.1%本品的乙醇溶液。
方法:噴后微溫。
結果:藍色背景呈紅色。
(5)酚類
①Emerson 試劑(4-氨基安替比林/鐵氰化鉀(Ⅲ))
檢出物:酚類、芳香胺類及揮發油。
溶液:I.4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml;Ⅱ.鐵氰化鉀(Ⅲ)4g溶于水50ml,用乙醇稀釋至100ml。
方法:先噴溶液I,在熱空氣中干燥5min,再噴溶液Ⅱ,再于熱空氣中干燥5min,然后將板置含有氨蒸氣(25%氨溶液)的密閉容器中。
結果:斑點呈橙-淡紅色。揮發油在亮黃色背景下呈紅色斑點。
②Boute 反應
檢出物:酚類、氯、溴、烷基代酚。
方法:將薄層置有NO2蒸氣(含濃硝酸)的容器中3~10min,再用NH2蒸氣(濃氨液)處理。
③氯醌(四氯代對苯醌)
檢出物:酚類。
溶液:1%本品的甲苯溶液。
④DDQ(二氯二氰基苯醌)試劑
檢出物:酚類。
溶液:2%本品的甲苯溶液。
⑤TCNE (四氰基乙烯)試劑
檢出物:酚類、芳香碳氫化物、雜環類、芳香胺類。
溶液:0.5%~1%本品的甲苯溶液。
⑥Gibb’s(2,6-二溴苯醌氯亞胺)試劑
檢出物:酚類。
溶液:2%本品的甲醇溶液。
⑦氯化鐵
檢出物:酚類、羥酰胺酸。
溶液:1%~5%氯化鐵的0.5mol/L鹽酸溶液。
結果:酚類呈藍色、羥酰胺酸呈紅色。
(6)含氮化合物
①FCNP(硝普鈉/鐵氰化物)試劑
檢出物:脂 肪族含氮化物,如氨基氰、胍、脲與硫脲及其衍生物,肌酸及肌酐。
溶液:10%氫氧化鈉溶液、10%硝普鈉溶液、10%鐵氰化鉀溶液與水按1:1:1:3混合,在室溫至少放置20min,冰箱保存數周,用前將混合液與丙酮等體積混合。
②Dragendorff(碘化鉍鉀試劑)試劑
檢出物:芳香族含氮化合物,如生物堿類、抗心律不齊藥物。
溶液:I.堿式硝酸鉍0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中;Ⅱ.碘化鉀8g溶于水20ml中。
將上述溶液I及Ⅱ等量混合,置棕色瓶中作為儲備液,用前取儲備液lml、冰醋酸2ml與水l0ml混合。
結果:呈橘紅色斑點。
③4-甲基傘形酮
檢出物:含氮雜環化合物。
溶液:本品0.02g溶于乙醇35ml,加水至100ml。
方法:噴板后置25%氨水蒸氣的容器中,取出后于紫外燈(365nm)下觀察。
④碘鉑酸鉀
檢出物:生物堿類及有機含氮化物。
溶液:10%六氯鉑酸溶液3ml與水97ml混合,加6%碘化鉀溶液,混勻。臨用前配制。
⑤硫酸高鈰銨/硫酸
檢出物:生物堿及含碘有機化物。
溶液:硫酸鈰1g混懸于4ml水中,加三氯乙酸1g,煮沸,逐滴加入濃硫酸直至混濁消失。
方法:噴后薄層于1l0oC加熱數分鐘。
結果:阿樸嗎啡、馬錢子堿、秋水仙堿、罌粟堿、毒扁豆堿與有機碘化物均能檢出。
⑥Ehrlich (對二甲氨基苯甲醛/鹽酸)試劑
檢出物:吲哚衍生物及胺類。
溶液:1%本品的濃鹽酸溶液與甲醇按1:1混合。
方法:噴后板于50oC加熱20min。
結果:呈不同顏色的斑點。
(7)胺類
①硝酸/乙醇
檢出物:脂肪族胺類。
溶液:50滴65%硝酸于乙醇100ml中。
方法:需要時120oC加熱。
②2,6-二氯醌氯亞胺
檢出物:抗氧劑、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氫化物、藥物、苯氧基乙酸除草劑等。
溶液:新鮮制備的0.5%~2%本品乙醇溶液。
方法:噴后薄層于110oC加熱10min,再用氨蒸氣處理。
③茜素
檢出物:胺類。
溶液:O.1%本品的乙醇溶液。
④丁二酮單肟/氯化鎳
檢出物:胺類。
溶液:I.丁二酮單肟1.2g溶于熱水35ml中,加氯化鎳0.95g,冷卻后加濃氨水2ml;
Ⅱ.鹽酸羥胺0.12g溶于200ml水中。
方法:將溶液I及Ⅱ混合,放置1天,過濾。
⑤Pauly (對氨基苯磺酸)試劑
檢出物:酚類、胺類和能偶合的雜環化合物。
溶液:磺酸4.5g溶于溫熱的12mol/L鹽酸45ml中,用水稀釋至500ml,取lOml于冰中冷卻,加4.5%亞硝酸鈉冷溶液lOml,于OoC放置15min。用前加等體積10%碳酸鈉溶液。
⑥硫氰酸鈷(Ⅱ).
檢出物:生物堿、伯、仲、叔胺類。
溶液:硫氰酸銨3g與氯化鈷1g溶于水20ml。
結果:白色至粉紅色背景上呈藍色斑點,2h后顏色消退。若將薄層噴水或放入飽和水蒸氣容器內,可重現色點。
⑦1,2-萘醌-4-磺酸鈉
檢出物:芳香胺類。
溶液:本品0.5g溶于95ml水,加乙酸5ml,濾去不溶物即得。
方法:噴后反應30min顯色。
⑧葡萄糖/磷酸
檢出物:芳香胺類。
溶液:葡萄糖2g溶于85%磷酸l0ml與水40ml混合液中,再加乙醇與正丁醇各30ml。
方法:噴后于115℃加熱l0min。
(8)硝基及亞硝基化合物
①α-萘胺
檢出物:3,5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。
溶液:I.O.5%α-萘胺乙醇溶液;
Ⅱ.10%氫氧化鉀甲醇溶液。
方法:先噴溶液I,再噴溶液Ⅱ。
結果:呈紅褐色斑點。
②二苯胺/氯化鈀
檢出物:亞硝胺類。
溶液:1.5%二苯胺乙醇溶液與0.1g氯化鈀的0.2%氯化鈉溶液lOOml,按5:1混合。
方法: 噴后置紫外光(254nm)下觀察。
結果:顯紫色斑點。
(9)氨基酸及肽類
①茚三酮
檢出物:氨基酸、胺與氨基糖類。
溶液:本品O.2g溶于乙醇l00ml中。
方法:噴后于110oC加熱。
結果:呈紅紫色斑點。
②茚三酮/乙酸鎘
檢出物:氨基酸及雜環胺類。
溶液:茚三酮1g及乙酸鎘2.5g溶于l0ml冰醋酸中,用乙醇稀釋至500ml。
方法:噴后于120oC加熱20min。
③1,2-萘醌-4-磺酸鈉
檢出物:氨基酸。
溶液:臨用前將本品O.02g溶于5%碳酸鈉l00ml中。
方法:噴后室溫干燥。
結果:不同氨基酸呈不同色點。
④靛紅/乙酸鋅
檢出物:氨基酸與某些肽類。
溶液:靛紅1g與乙酸鋅1g溶于95%異丙醇l00ml中,加熱至80oC,冷卻后加乙酸1ml,冰箱保存。
方法:噴后于80~85"C加熱30min。
⑤茚三酮/冰醋酸
檢出物:二肽及三肽。
溶液:1%茚三酮吡啶溶液與冰醋酸按5:1混合。
方法:噴后于l00oC加熱5min。
⑥香草醛
檢出物:氨基酸及胺類。
溶液:I.本品1g溶于丙醇50ml中;
Ⅱ.1mol/L氫氧化鉀溶液lml,用乙醇稀釋至lOOml。
方法:先噴溶液I后于110oC干燥l0min,再噴溶液Ⅱ,于110oC再干燥l0min,于紫外光(365nm)下觀察。
(10)甾類
①香草醛/硫酸
檢出物:甾體激素。
溶液:1%香草醛濃硫酸溶液。
方法:噴后于105℃加熱5min。
②氯化錳
檢出物:雌激素類。
溶液:氯化錳0.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。
方法:噴后置紫外光(365nm)下觀察。
③高氯酸
檢出物:甾體激素。
溶液:5%高氯酸甲醇溶液。
方法:噴后于110oC加熱5min,置紫外光(365nm)下觀察。
④三氯化銻/乙酸
檢出物:甾類與二萜類。
溶液:三氯化銻20g溶于乙酸20ml與氯仿60ml混合液中。
方法:噴后于100oC加熱5min,紫外光長波下觀察。
結果:二萜類斑點呈紅黃-藍紫色。
⑤對甲苯磺酸
檢出物:甾族化合物、黃酮類與兒茶酸類。
溶液:20%本品的氯仿溶液。
方法:噴后于100oC加熱數分鐘,紫外光長波下觀察。
結果:斑點呈熒光。
⑥氯磺酸/乙酸
檢出物:三萜、甾醇與甾族化合物。
溶液:氯磺酸5ml在冷卻下加乙酸l0ml溶解。
方法:噴后于130oC加熱5~l0min,置紫外光長波下觀察。
結果;斑點顯熒光。
(11)糖類
①茴香胺、鄰苯二酸試劑
檢出物:碳氫化合物。
溶液:1.23g茴香胺及1.66g鄰苯二酸于l00ml 95%乙醇中的溶液。
方法:噴霧或浸漬。
結果:己糖呈綠色、甲基戊糖呈黃綠色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。
②四乙酸鉛/2,7一二氯熒光素
檢出物:甙類、酚類、糖酸類
溶液:I.2%四乙酸鉛的冰醋酸溶液;Ⅱ.1%2,7一二氯熒光素乙醇溶液。
取溶液I、Ⅱ 各5ml混勻,用干燥的苯或甲苯稀釋至200ml,試劑溶液只能穩定2h。
方法:浸板。
③鄰氨基聯苯/磷酸
檢出物:糖類。
溶液:O.3g鄰氨基聯苯加85%磷酸5ml與乙醇95ml。
方法:噴板后llOoC加熱15~20min。
結果:斑點呈褐色。
④苯胺/二苯胺/磷酸
檢出物:還原糖。
溶液:4g二苯胺、4ml苯胺與20ml 85%磷酸共溶于200ml丙酮中。
方法:噴后于85℃加熱l0min。
結果:產生各種顏色。1,4-己醛糖、低聚糖呈藍色。
⑤雙甲酮/磷酸
檢出物:酮糖。
溶液:雙甲酮(5,5-二甲基環己烷-1,3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇與l0ml 85%磷酸中。
方法:噴板后于110oC加熱15~20min。
結果:日光下觀察,白色背景上呈黃色斑點,紫外光長波下呈藍色熒光。
⑥聯苯胺/三氯乙酸
檢出物:糖類。
溶液:0.5g聯苯胺溶于l0ml乙酸,再加10ml40%三氯乙酸水溶液,用乙醇稀釋至l00ml。
方法:噴后置紫外光下照射15min。
結果:斑點呈灰棕-紅褐色。
⑦對二甲氨基苯甲醛/乙酰丙酮
檢出物:氨基糖類。
溶液:I. 5ml 50%氫氧化鉀溶液與20ml乙醇混勻,取此溶液0.5ml,加乙酰丙酮0.5ml與正丁醇50ml的混合液l0ml,此兩種溶液均需新鮮配制,臨用前混合;
Ⅱ. 1g對二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中,再加30ml濃鹽酸,需要時此溶液可用正丁醇180ml稀釋。
方法:先噴I后于105oC加熱5min,再噴Ⅱ,然后于90℃干燥5min。
結果:斑點呈紅色。
(12)殺蟲劑
①甲基黃
檢出物:氯化殺蟲劑及抗菌化合物。
溶液:O.1g甲基黃于70ml乙醇中,加25ml水并用乙醇稀釋至l00ml。
方法:噴板后于室溫干燥,并在無濾光片紫外光下照射5min。
結果:黃色背景上呈紅色斑點。
②溴/四氯化碳
檢出物:有機磷殺蟲劑。
溶液:10%溴的四氯化碳溶液。
方法:薰溴蒸氣。
③錳/水楊醛
檢出物:有機硫代磷殺蟲劑。
溶液:I.100mg氯化錳溶于100ml 80%乙醇;
Ⅱ.溶解1.3g 2-肼喹啉于小量熱乙醇中,溶1g水楊醛于5ml乙醇并加1~2滴冰醋酸,合并兩溶液并回流30min,冷卻后析出水楊-2-醛-2-喹啉腙沉淀,并用乙醇重結晶。用50mg此衍生物溶于100ml乙醇中。
方法:等量溶液I及Ⅱ混合后,噴板。
④二苯胺/氯化鋅
檢出物:氯化殺蟲劑(DDT、CPCA、氯-DDT、克菌丹、甲氧氯、毒殺芬)。
溶液:二苯胺及氯化鋅各0.5g溶于100ml丙酮中。
方法:噴后200oC加熱5min。
⑤溴/熒光素/硝酸銀
檢出物:殺蟲劑。
溶液;I.5%溴的四氯化碳溶液;
Ⅱ.1ml 0.25%熒光素的二甲基甲酰胺溶液,用乙醇稀釋至50ml;
Ⅲ.1.7g硝酸銀溶于5ml水中,加2-苯氧基乙醇,用丙酮稀釋至200ml。
方法:展開后的薄層置試液I容器中薰30s,取出先噴溶液Ⅱ,再噴溶液Ⅲ,再置紫外光下7min。
(13)黃酮類
①乙醇胺二苯硼酸鹽
檢出物:黃酮類。
溶液:I. 1%乙醇胺二苯硼酸鹽的甲醇溶液;Ⅱ. 5%聚乙二醇的乙醇溶液。
方法:先噴溶液I,再噴溶液Ⅱ使熒光穩定,再在紫外光長波下照射2min。
結果:紫外燈下觀察熒光。
②三氯化銻
檢出物:黃酮類。
溶液:10%三氯化銻的氯仿溶液。
方法:噴板。
結果:紫外光長波下呈熒光。
③三氯化鋁
檢出物:黃酮類。
溶液:1%三氯化鋁乙醇溶液。
方法:噴板。
結果:紫外光長波下顯黃色熒光。
④Benedict(硫酸銅/枸櫞酸鈉)試劑
檢出物:含鄰二羥基的黃酮類及香豆精類。
溶液:1.73g 硫酸銅(CuS04·5H20):17.3g 枸櫞酸鈉及10g 無水碳酸鈉溶于水并稀釋至1 00ml。
方法:噴板。
結果:紫外光長波下觀察,含鄰二羥基的化合物,斑點熒光減弱或猝滅。
(14)含硫化合物
①硝普鈉
檢出物:巰基-SH基(半胱氨酸)、雙硫化物、-s-s-基(胱氨酸)及精氨酸。
溶液:I. 1.5g 硝普鈉溶于5ml 2mol/L鹽酸溶液及95ml甲醇中,加10ml 25%氫氧化銨溶液,過濾,即得;Ⅱ. 2g氰化鈉溶于5ml水,用甲醇稀釋至100ml。
方法:先噴溶液I、再噴溶液Ⅱ。
結果:巰基化合物呈紅色;精氨酸由橙變為灰藍色;雙硫化物在黃色背景上顯紅色。
②FCNP(硝普鈉/鐵氰化物)試劑
檢出物:脂肪族含硫化臺物,如氨基氰、硫脲及其衍生物。
溶液:10%氫氧化鈉溶液、10%硝普鈉溶液,10%鐵氰化鉀溶液與水按1:1:1:3混合,用前與等體積丙酮混合,用時新鮮配制。
○3氯化鐵/磺基水楊酸
檢出物:硫代磷酸酯類。
溶液:I.1%氯化鐵的80%乙醇溶液;Ⅱ.1%磺基水楊酸的80%乙醇溶液,
方法:薄層先置溴蒸氣中10min后,噴溶液I,干燥15min,再噴溶液Ⅱ。
結果:紫色背景上呈白色。
④疊氮化碘
檢出物:含硫氨基酸、硫化物與青霉素。
溶液:疊氮碘溶液-疊氮鈉3g 溶乎100ml 0.05mol/L碘溶液中(新鮮配制,固體疊氮碘有爆炸性)。
⑤靛紅/硫酸
檢出物:噻吩衍生物。
溶液;0.4g靛紅溶于100ml濃硫酸中。
方法:噴板后120oC加熱。
結果:呈不同顏色。
(15)類脂化合物
①磷鉬酸
檢出物:膽酸、類脂化物、脂肪酸及甾類。
溶液:250mg 磷鉬酸于50ml乙醇中。
方法:唆后予120oC加熱。
②羅丹明6G
檢出物;類脂化物。
溶液:lg 羅丹明6G溶于100ml丙酮中.
方法:噴后置紫外光長波下觀察。
③溴百里酚藍
檢出物:類脂化物。
溶液:O.04g溴百里酚藍溶于100ml O.01mol/L氫氧化鈉溶液中。
(16)陽離子
①雙硫腙
檢出物:金屬離子。
溶液:20mg雙硫腙溶于100ml丙酮中,置棕色瓶中于冰箱內保存。
方法:上述溶液噴板后再噴25%氫氧化銨溶液。
②紅氨酸 (二硫代草酰胺)
檢出物:重金屬離子。
溶液:0.5%紅氨酸乙醇溶液。
方法:先噴上述溶液,稍干后置薄層于氨蒸氣中。。
③茜素
檢出物:眾多陽離子、稀土及鈾。
溶液:茜素乙醇飽和溶液。
方法:噴板后直接放入氨蒸氣中。
④亞鐵氰化鉀
檢出物:Fe3+、Cu2+、Cl、Mo、V、W離子。
溶液:新配制的2%亞鐵氰化鉀溶液。
⑤二苯卡巴肼
檢出物:Ag+、pb2+、Hg2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+、Zn2+、Ni2+、Co2+及Ca2+離子。
溶液:I.1%~2%二苯卡巴肼乙醇溶液;Ⅱ.25%氫氧化銨溶液。
方法:先噴溶液I,再噴溶液Ⅱ。
結果:Ni2+呈藍色、Co2+呈橙褐色、Zn2+呈紅紫色,Ag+、pb2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+呈褐色、乙酸汞加成物于80oC加熱片刻,斑點呈藍色。
(17)陰離子
①硝酸銀
檢出物:含硫陰離子、砷酸鹽、亞砷酸鹽磷酸鹽、亞磷酸鹽及除氟外的鹵素。
溶液:0.1~0.5mol/L硝酸銀溶液中加氨水直至沉淀溶解。臨用前配制、儲存會形成易爆物質。
方法:噴后于110~120oC加熱l0min,必要時置紫外光下l0min。
②硝酸銀/氫氧化銨/熒光素
檢出物:鹵素離子。
溶液:I.1g硝酸銀溶于l00ml O.5mol/L氫氧化銨溶液中; Ⅱ.1g熒光索溶于l00ml乙醇中。
方法:先噴溶液I,稍干,再噴溶液Ⅱ。
③鉬酸銨/亞硫酸鈉
檢出物:硫化物、硫代硫酸鹽與磷酸鹽。
溶液:I.5%鉬酸銨的lmol/L硫酸溶液; Ⅱ.5%亞硫酸鈉溶液。
方法:先噴溶液I,再噴溶液Ⅱ,于105℃加熱30min。
結果:硫化物及硫代硫酸鹽呈深藍色,磷酸鹽呈藍灰色。
④番木鱉堿
檢出物:溴酸鹽、硝酸鹽、氯酸鹽。
溶液:I.0.02%番木鱉堿的lmol/L硫酸溶液; Ⅱ.2mol/L氫氧化鈉溶液。
方法:先噴溶液I,再噴溶液Ⅱ。
結果:溴酸鹽、氯酸鹽呈血紅色,硝酸鹽呈橙黃色。
日期:2008年2月3日 - 來自[常用試劑]欄目

15款唇彩kiss滋味大比拼

  Dior 癮誘夢露親光唇彩

  味道 糖果味

  顯色度 ★★★★

  光澤 ★★★

  Kiss感:太粘像膠水

  AWAKE 盈潤漾彩唇蜜

  味道 膠水味

  顯色度 ★★★★

  光澤 ★★★★★

  Kiss感:吻出滿嘴亮片

  M.A.C 晶凍魔唇

  味道 無味

  顯色度 ★★★★

  光澤 ★★★★★

  Kiss感:水水的好想親

  CHANEL 水晶糖唇蜜

  味道 淡雅清香

  顯色度 ★★

  光澤 ★★★

  Kiss感:有吃糖果的感覺

  BOBBI BROWN 晶紗亮唇

  味道 淡雅清香

  顯色度 ★★★

  光澤 ★★

  Kiss感:太粘太厚

  Dior 吻誘唇蜜

  味道 水果味

  顯色度 ★★

  光澤 ★★★★

  Kiss感:不好推,像親膠水

  BOBBI BROWN SPF15防曬亮唇蜜

  味道 淡雅清香

  顯色度 ★★★

  光澤 ★★

  Kiss感:有點粘,但感覺不差

  水潤質感的唇蜜

  L’OREAL 蜜光唇彩

  味道 甜甜香味

  顯色度 ★★★

  光澤 ★★★★

  Kiss感:味道清淡,很不賴

  LANCOME 果凍亮唇蜜

  味道 哈密瓜味

  顯色度 ★★★★

  光澤 ★★★★★

  Kiss感:我男友不愛哈密瓜味

  GUERLAIN KissKiss親親唇蜜

  味道 糖果味

  顯色度 ★★★★★

  光澤 ★★★

  Kiss感:顏色都跑到男友嘴上了

  CLARINS 亮唇甜蜜

  味道 糖果味

  顯色度 ★★★

  光澤 ★★★

  Kiss感:味道香到好像在吃糖果

  BIOTHERM 玩妍色唇蜜

  味道 水果味

  顯色度 ★★★

  光澤 ★★★

  Kiss感:水水不粘也沒怪味

  BEAUTé de KOSé 豐盈炫彩蜜

  味道 淡花香

  顯色度 ★★★★★

  光澤 ★★

  Kiss感:然清香又好親,不會油

  CLINIQUE 水漾晶亮唇蜜

  味道 牛奶糖

  顯色度 ★★★

  光澤 ★★★

  Kiss感:會沾染嘴唇

  DHC 水漾唇蜜

  味道 無味

  顯色度 ★★

  光澤 ★★★

  Kiss感:親起來好像沒涂 (國際在線)


日期:2006年3月31日 - 來自[時尚妝容]欄目

ELISA顯色法測定乙肝五項假陽性原因分析

  我們在用ELISA顯色法測定乙肝五項的過程中,會不同程度出現假陽性。為此,我們經過仔細的觀察與實踐,發現了ELISA法測定乙肝五項中出現假陽性的幾種原因,今天寫出來與同行們共討,以便在未來工作中盡量減少出現失誤,提高我們的檢驗工作水平。

    在一次工作中,我們發現所做乙肝五項的反應板都呈現藍色,驚訝之余,仔細查找原因,結果發現,操作至待顯色的反應板置于6%“84”消毒液剛擦拭過的桌面上,會使其反應結果均顯藍色。為進一步證實,我們便做了以下試驗。

  1 材料

    1.1 “84”消毒液購自上海利康消毒高科技有限公司。1.2 乙肝五項試劑購自北京萬泰生物有限公司。

  2 方法與結果

    2.1 方法 將已知的HBsAg陽性、陰性和弱陽性的血清操作至顯色時,分為6組,分別于1min、5min、10min、15min、20min、25min加上顯色劑后,置于用6%“84”消毒液擦試過的桌面上(桌面上無明水,但有濕度)放置15min至25min觀察結果。當20min過后,我們發現,其結果均呈藍色。
 
  2.2 結果 將已知的HBsAg陽性標本操作至加顯色劑后分別加入不同濃度“84”消毒液5μl。隨“84”消毒液濃度減少其顯色逐漸呈:黃綠、棕紅、淡藍、藍色,至0.001%濃度無顏色改變。

    3 討論

  我們所用ELISA法中的“B”顯色劑,主要成份是四甲基聯苯胺(TMB),而酶標記物中的酶為辣根過氧化物酶。“84消毒液的主要成份為要效氯,分解后的游離氯能取代ELISA顯色劑B液(TMB)上的氫,使其呈藍色(鹵代反應),而高濃度的“84”消毒液呈酸性,可使TMB呈黃色。由此可見,當“84”消毒液在空氣中的濃度大于0.001%時,即可對ELISA法的顯色造成影響,使結果為假陽性。因此我們認為,“84”消毒液可對ELISA法所有以TMB做底物的試驗有影響。為找到有效的解決假陽性的辦法,我們打開門窗、換氣扇,工作人員的手和衣物均不接觸“84”消毒液,再把所有的標本重新洗滌5次,加上顯色劑,除弱陽性標本外,其余均與未被干擾結果相符。故被“84”消毒液影響的標本均應重做,以免影響結果。

  作者單位:454001河南省焦作市第二人民醫院檢驗科

日期:2005年5月31日 - 來自[誤診分析]欄目

標化酮體粉顯色法在獻血者ALT初篩中應用價值初探

  隨著無償獻血公益事業的發展,單項ALT陽性成為許多血站血液報廢的主要原因之一。筆者經過反復實驗,將過去的酮體粉顯色法標化為半定量法,在獻血者初篩中應用,收到了顯著效果。現報告如下。

  1 材料與方法

    1.1 材料 酮體粉、基質液(實驗室自制) [1]  ,陽性對照(速率法Cutoff值附近報廢血血漿分裝冷凍),陽性對照(正常人血漿分裝冷凍),45℃水浴箱。

  1.2 方法

    1.2.1 加樣 在凹型紙卡上滴加1滴(約50μl)陽性對照,1 滴(50μl)陰性對照,按順序滴加待檢血漿或血清標本各1滴。

    1.2.2 孵育 在對照及標本上各加1滴基質液,輕輕振蕩混勻,放于45℃水浴箱中孵育15min。

    1.2.3 觀察 在對照及標本上分別加適量酮體粉(以覆蓋液面為度),3min以內觀察顏色反應。比陽性對照顏色深的判為陽性,淘汰此獻血者。

  2 結果
  
  見表1。

    表1 街頭采血與集體組織獻血ALT復檢結果對比略

    3 討論

  由表1可見,經標化酮體粉法ALT初篩的復測標本數28485,陽性率0.54%,而未經過初篩的復測標本數14394,陽性率1.83%,二者差異有非常顯著性(U=12.87,P<0.001)。人體ALT主要分布于肝臟,其次為腎臟、心臟及肌肉,其增高的原因除了由病原體(如HBV、HCV、HIV及其它尚未認識的病原體)感染引起肝膽疾病、心血管疾病、骨骼肌疾病及某些藥物的毒物作用外,一些非病理性原因,如體重增加、運動、飲酒、以及疲勞也可以引起ALT增高 [2]  。因此,單項ALT輕中度升高在健康獻血者中很常見,不做ALT初篩,必將帶來血液報廢率升高。目前,對于無償獻血者,大多數血站采用金標法對乙肝進行初篩,反應時間約15~30min,而標化酮體粉法ALT篩檢約20min,不會造成獻血者過久等待化驗結果,也避免了寶貴的血液資源的浪費,而且該方法價格低廉,省時省力,既適合大批量篩檢,也適合單個標本篩查,筆者認為該方法值得推廣應用。

  參考文獻

    1 肖星甫.輸血技術手冊.成都:四川科學技術出版社,1992,463-464.

    2 陳長榮,彭瓊,張永昌,等.廈門市無償獻血者ALT檢測結果分析.中國輸血雜志,2002,15(6):401. 
  作者單位:1 063000河北省唐山市中心血站
  
       2 063000河北省唐山市工人醫院 

日期:2005年5月26日 - 來自[檢驗與臨床]欄目
共 1 頁,當前第 1 頁 9 1 :


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