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幾種檢測尿液紅細胞的方法及其評價

來源:中華醫學研究雜志 作者:黃曉群 胡秀瓊 2006-8-19

摘要: 正常人尿中排出紅細胞甚少,偶然一次離心尿內可不見或偶見紅細胞,24h尿中排出的紅細胞數不超過100萬。離心后的尿液,每高倍視野平均可見到1~2個紅細胞為異常表現 [1] 。目前檢測尿紅細胞的方法有尿紅細胞定性檢測,尿紅細胞定量檢測,尿紅細胞的形態鑒別。 1 尿細胞的定性檢測 1。...


  正常人尿中排出紅細胞甚少,偶然一次離心尿內可不見或偶見紅細胞,24h尿中排出的紅細胞數不超過100萬。離心后的尿液,每高倍視野平均可見到1~2個紅細胞為異常表現 [1] 。病理性血尿對診斷泌尿系統疾病均有臨床診斷參考價值。目前檢測尿紅細胞的方法有尿紅細胞定性檢測,尿紅細胞定量檢測,尿紅細胞的形態鑒別。如何選用,合理分析和評價結果的可靠性,對疾病的診斷非常重要。

  1 尿細胞的定性檢測
    
  1.1 干化學尿紅細胞檢查 原理是血紅蛋白中亞鐵血紅素有弱過氧化物酶樣作用,可使試帶中的過氧化酶(AO 2 )放出新生氧,將鄰聯甲苯胺受體氧化成藍色化合物。該法即刻檢出尿中紅細胞或游離血紅蛋白,即可作為紅細胞鏡檢的篩選法,又可彌補鏡檢不能發現紅細胞不足。缺點是影響測定結果的因素較多,常有假陰性和假陽性出現,因此尿沉渣中的細胞數與試帶法結果并無一致關系 [2] 。
   
  1.2 試管法 某原理是血紅蛋白的亞鐵血紅素與氧化酶的結構相似(但其結合的蛋白不同)而且有弱過氧化物酶活性,能催化過氧化氫放出新生氧,氧化受體氨基比林使之顯色,借以識別微量血紅蛋白的存在。為常量法,容易觀察結果,過去聯苯胺為常用的試劑,反應靈敏,結果鮮明,但因有致癌性,近來已屬禁用范疇。現用的試劑還有還原酚酞和無色孔雀綠等。
   
  1.3 單克隆抗體免疫尿紅細胞檢查 單克隆抗體免疫尿紅細胞檢測的原理:尿液中紅細胞或血紅蛋白與試劑中單克隆結合并顯色,判斷尿中有無細胞。是尿紅細胞的鑒別診斷法,假陽性率低,但過于敏感,不適合常規尿紅細胞的檢測。
    
  2 尿紅細胞定量檢查
    
  2.1 顯微鏡尿紅細胞定量檢測 該方法是當今腎泌尿系統疾病重要的診斷依據,也是規范尿液分析的重要內容,迄今為止尚無一種自動化儀器能代替鏡檢,其缺點是不能檢出血紅蛋白尿液,規范化沉渣鏡檢操作較為繁瑣,為獲得準確的試驗結果要有高素質的工作人員和標準化的檢驗儀器。
   
  2.1.1 過篩法 留病人新鮮晨尿,混合后直接滴入血紅細胞計數池內,計數5大格中紅細胞結果×2,得出每μl數。

  2.1.2 1h尿沉渣計數 患者先排尿棄去,準確收集3h尿液于清潔干燥容器內送檢,準確測量3h的尿量,取混合尿液10ml置刻度離心管內,1500r/min離心5min,用吸管吸棄上層尿液9ml,留下1ml混勻,吸取尿液1滴,注入血細胞計數板內,紅細胞共數10個大格,計數血細胞數,紅細胞數男性<3萬/h,女性<4萬/h [3] 。
   
  2.1.3 尿沉渣鏡檢標準化檢測尿液紅細胞數 操作步驟取新鮮尿液10ml,離心(1500r/min)5min后,取0.2ml尿沉渣充盈到標準化尿沉渣計數板內,計算出細胞數/μl [4] 。
   
  2.2 尿流式細胞儀檢測尿中的紅細胞數 其原理以激光散射強度、波幅、熒光強度、波幅等技術識別計數尿中紅細胞數。優點是操作簡單,快速自動進樣,自動分析,便于質量控制,1min內可得出結果。重復性好、誤差小、不受人為因素影響等。其缺點是尿液分析儀昂貴,干擾因素多,影響計數結果,因此儀器出現報警時必須作鏡檢分析,力求達到尿流式細胞儀,干化學與人工鏡檢互補,以提高尿紅細胞的檢測質量 [5] 。

  3 鑒別尿液中細胞形態
    
  新鮮尿中紅細胞形態對鑒別腎小球源性和非腎小球源性血尿有重要價值。腎小球血尿多為變形細胞血尿,或以其為主的混合性血尿。非腎小球疾病的血尿,則多為均一性血尿 [6] 。
   
  3.1 普通顯微鏡法 (1)非染色法,由于缺乏色澤對比和立體感,不易鑒別。(2)染色法(甲基綠色,結晶紫—沙黃染色,瑞氏染色)可增加形態鑒別特征。
   
  3.2 相差顯微鏡法 紅細胞立體感強,易于鑒別。
   
  3.3 血液分析儀 可通過測定紅細胞的MCV和RDW進行鑒別,腎性血尿以小紅細胞為主,MCV小于血中的紅細胞的MCV,非腎性血尿以大紅細胞為主,MCV大于血中紅細胞的MCV,腎性血尿RDW增大,非腎性血尿RDW正常。
  3.4 尿液中有形成分分析 如日本的SysmexuF-100,可將尿液中的成分作熒光染色后識別,如腎性血尿,紅細胞的散射光分布在圖形左側,而非腎性血尿,紅細胞數散射光分布在圖象右側。
   
  3.5 掃描電鏡 該法檢測敏感,但價格昂貴,難于普及。 以上方法以相差顯微鏡為首選。
   
  綜上所述,尿液紅細胞檢查包括定性方面的檢測,定量方面的檢測,紅細胞的形態、鑒別,各有優點和不足,在實際應用中,應了解其互補關系,根據病情科學地選擇不同的檢測方法,提高尿液紅細胞檢測的質量,為臨床提供可靠,準確的實驗依據,當然更期待既快速、可靠,又簡單、功能齊備的新的檢測方法出現。

  【參考文獻】
    
  1 李滌生.臨床檢驗基礎.北京:人民衛生出版社,1988,190.
   
  2 叢玉隆,宋國良,周建山.干化學分析與管型檢查的關系研究.中華醫學檢驗雜志,1997,20:138-139.
   
  3 李滌生.臨床檢驗基礎.北京:人民衛生出版社,1988,173.
   
  4 葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程,第二版.南京:東南大學出版社,1997,138.
   
  5 蔡應木,林靜華,焦曉陽.對全自動尿液沉渣分析儀檢測結果的質量控制.中華醫學檢驗雜志,2002,20:154.
   
  6 夏銨安,胡玉祥.衛生專業技術資格考試指導,臨床醫學檢驗(上).濟南:山東大學出版社,2004,44.
    
  (編輯:秋 實)

  作者單位:620500四川省仁壽縣人民醫院 



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